心脏灌流心肌细胞铁死亡检测
检测项目
铁代谢指标:
- 铁离子浓度:游离铁(Fe^{2+},参照ISO17294)、铁蛋白含量(μg/mL)
- 转铁蛋白饱和度:饱和率(%)、未饱和铁结合能力(μmol/L)
- 谷胱甘肽水平:还原型谷胱甘肽(GSH,μM)、氧化型谷胱甘肽(GSSG,μM)
- 活性氧物质:超氧阴离子(O_2^-,nmol/min/mg)、过氧化氢(H_2O_2,μM)
- 丙二醛含量:MDA(nmol/mg,参照GB/T5009.181)
- 4-羟基壬烯醛:HNE(ng/mL)
- 铁死亡特异性基因:GPX4表达量(foldchange)、ACSL4活性(U/mg)
- 凋亡相关蛋白:Caspase-3活性(%)、Bcl-2/Bax比值
- 细胞存活率:MTT法(OD值≥0.8)、LDH释放量(U/L)
- 膜完整性:台盼蓝排斥率(%)、钙离子内流(nM)
- 线粒体结构:线粒体肿胀指数、嵴断裂评分(0-5级)
- 细胞核形态:核固缩率(%)、染色质凝聚度
- 铁死亡通路基因:SLC7A11表达量(foldchange)、FTH1mRNA水平
- 调控因子:Nrf2激活状态(%)、p53磷酸化水平
- 关键蛋白检测:Ferritin含量(μg/mL)、Transferrin受体密度
- 磷酸化状态:p-ERK/p-JNK比值、p-AKT活性
- 脂质代谢物:磷脂酰乙醇胺含量(μg/mg)、胆固醇酯化率(%)
- 能量代谢:ATP水平(μmol/g)、乳酸产生量(mM)
- 细胞因子:IL-6浓度(pg/mL)、TNF-α水平(pg/mL)
- 趋化因子:MCP-1表达量(foldchange)
检测范围
1.离体大鼠心脏灌流模型:模拟缺血再灌注损伤,重点检测铁死亡诱导的脂质过氧化和细胞活力变化
2.人心肌细胞原代培养:针对药物毒性研究,侧重铁离子代谢失衡和基因表达异常
3.小鼠心脏组织切片:用于病理模型分析,检测形态学损伤和氧化应激标志物
4.干细胞分化心肌细胞:评估再生医学应用,重点监控铁死亡相关蛋白表达和代谢功能
5.心脏器官芯片模型:微流体环境下检测细胞死亡动态,侧重实时铁离子波动和膜完整性
6.心肌缺血模型:模拟缺氧条件,检测谷胱甘肽耗竭和活性氧积累
7.药物干预样本:抗铁死亡化合物测试,重点分析基因调控因子和细胞存活率
8.转基因动物心脏:特定基因敲除或过表达,检测铁死亡通路变异和炎症反应
9.临床活检组织:人类心脏疾病样本,侧重丙二醛含量和线粒体结构损伤
10.体外共培养系统:心肌细胞与成纤维细胞互作,检测铁死亡传播和细胞因子释放
检测方法
国际标准:
- ISO10993-5:2009医疗器械生物学评价细胞毒性试验
- ISO17294-2:2016水质电感耦合等离子体质谱法金属元素测定
- ISO17025:2017检测和校准实验室能力通用要求
- GB/T16886.5-2017医疗器械生物学评价细胞毒性试验
- GB/T5009.181-2003食品中丙二醛的测定
- GB/T27404-2008实验室质量控制规范分子生物学检测
检测设备
1.分光光度计:ThermoScientificNanoDrop2000(波长范围190-840nm,分辨率0.1nm)
2.流式细胞仪:BDFACSCalibur(激光波长488nm,检测通道6个)
3.荧光显微镜:OlympusIX83(物镜放大倍数100x,CCD分辨率5MP)
4.实时PCR仪:AppliedBiosystemsQuantStudio5(热循环温度范围4-99°C,通量96孔)
5.高效液相色谱仪:Agilent1260InfinityII(流速范围0.001-10mL/min,检测限0.01ng)
6.电感耦合等离子体质谱仪:PerkinElmerNexION350D(元素检测范围Li-U,精度±0.1ppb)
7.细胞培养箱:ThermoScientificHeracell150i(温度控制37±0.5°C,CO_2浓度5%)
8.酶标仪:BioTekSynergyH1(检测模式吸光/荧光/发光,波长范围200-1000nm)
9.透射电子显微镜:JEOLJEM-1400(加速电压80kV,分辨率0.2nm)
10.气相色谱仪:ShimadzuGC-2010Plus(载气流速0.1-10mL/min,检测器FID)
11.超速离心机:BeckmanCoulterOptimaXPN-100(转速范围0-100,000rpm,温度控制-10-40°C)
12.微孔板洗涤器:BioTekELx405(洗涤通道8个,精度±1μL)
13.细胞计数仪:CountessIIFL(荧光检测通道3个,样本体积20μL)
14.电生理记录系统:MolecularDevicesAxonAxopatch200B(电压钳范围±200mV,采样率100kHz)
15.低温存储箱:EppendorfCryoCubeF240(温度范围-150°C至-80°C,容量240L)
北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】
报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。
检测周期:7~15工作日,可加急。
资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。
标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。
非标测试:支持定制化试验方案。
售后:报告终身可查,工程师1v1服务。